亚洲永久精品免费www|欧美.日韩.日本中亚网站|91香蕉亚洲精品人人影视|91夜夜夜精品一区二区|91精选日韩综合永久入口|91亚洲永久精品免费www52zcm|91丨国产丨精品入口

服務咨詢熱線:

021-66030766

TECHNICAL ARTICLES

技術文章

當前位置:首頁技術文章蛋白質技術專題:血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳

蛋白質技術專題:血清蛋白瓊脂糖凝膠電泳

更新時間:2019-02-27點擊次數:2214

【原理】

瓊脂糖(agarose)是經過挑選,以質地較純的瓊脂(agar)作為原料而制成的。瓊脂在化學上是由瓊脂糖和瓊脂膠組成的復合物。瓊脂膠是一含有硫酸根和羥基的多糖,它具有離子交換性質,這種性質會給電泳及凝膠過濾以的影響。瓊脂糖是直鏈多糖,它由D-半乳糖和3,6-脫水-L-半乳糖的殘基交替排列組成。
瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因為固體支持物的影響少,故電泳速度快,區帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團,電滲影響很少,是一種較好的電泳材料,分離效果較好。
血清中脂類物質與血清載脂蛋白結合成水溶性的脂蛋白(lipoprotein)形式存在。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數量不同,各種脂蛋白顆粒大小也相差很大,因此,以瓊脂糖凝膠為支持物,在電場中可使各種脂蛋白顆粒分離開來。
瓊脂糖凝膠電泳分離血清蛋白方法簡單。將血清脂蛋白用脂類染料蘇丹黑(或油紅等)進行預染。再將預染過的血清加樣于瓊脂糖凝膠板加樣槽中,通電后可以看到脂蛋白向正極移動,并分離出幾個區帶。
正常人血清脂蛋白可出現三條區帶,從陰極到陽極依次為β-脂蛋白(深),前β-脂蛋白(淺)及α-脂蛋白(比前β-脂蛋白略深些),在原點處應無乳糜微粒。有時前β-脂蛋白也顯示不出來。
瓊脂糖主要通過氫鍵而形成凝膠。電泳時因凝膠含水量大(98-99%),近似自由電泳,因為固體支持物的影響少,故電泳速度快,區帶整齊。而且由于瓊脂糖不含帶電荷的基團,電滲影響很少,是一種較好的電泳材料,分離效果較好。
血清中脂類物質與血清載脂蛋白結合成水溶性的脂蛋白(lipoprotein)形式存在。各種脂蛋白中所含載脂蛋白的種類及數量不同,各種脂蛋白顆粒大小也相差很大,因此,以瓊脂糖凝膠為支持物,在電場中可使各種脂蛋白顆粒分離開來。
瓊脂糖凝膠電泳分離血清蛋白方法簡單。將血清脂蛋白用脂類染料蘇丹黑(或油紅等)進行預染。再將預染過的血清加樣于瓊脂糖凝膠板加樣槽中,通電后可以看到脂蛋白向正極移動,并分離出幾個區帶。
正常人血清脂蛋白可出現三條區帶,從陰極到陽極依次為β-脂蛋白(深),前β-脂蛋白(淺)及α-脂蛋白(比前β-脂蛋白略深些),在原點處應無乳糜微粒。有時前β-脂蛋白也顯示不出來。

【操作】

1、預染血清血清0.2ml中加蘇丹黑染色液0.2ml,混合置37℃水浴中染色30分鐘,離心(2000轉/分)約5分鐘。以除去懸浮于血清中染料沉渣。
2、制備瓊脂糖凝膠板將已配制好的0.5%瓊脂糖凝膠于沸水浴中加熱融化,用吸管吸取凝膠溶液澆注在載玻片上,約3 ml。靜置半小時后凝固(天熱時需延長,也可放入冰箱中數分鐘以加速凝固)。
3、點樣將剪好的濾紙條對折,以折邊在距凝膠一端2cm處切一點樣口。將毛細管插入預染好的血清中,待吸入部分血清后,取毛細管使其有樣品的一端靠于點樣口端部,停靠3秒左右。
4、電泳將凝膠板平放入電泳槽中,使加樣端接在陰極一側,用四層濾紙或紗布做成“引橋”,敷于膠板的兩端,各搭住凝膠板約1cm左右,“引橋”的另一端浸于電泳槽內的緩沖液中。接通電源,首先調節電流為3-4mA/凝膠板,電泳10-15分鐘;然后調節電流為6-7mA/凝膠板,電泳30-40分鐘,即可觀察到分離的區帶。
5、如果需要保留電泳圖譜,可將電泳后的凝膠板(連同載玻片)放入清水中浸泡脫鹽2小時,然后放烘箱(80℃左右)中烘干即可。

【試劑】
1、蘇丹黑染色液將蘇丹黑B加到無水乙醇中至飽和,搖蕩使乙?;?。用前過濾。
2、緩沖液稱取鈉15.4g、2.76g及EDTA0.29g,加水溶解后再加蒸餾水至1000ml(pH為8.6,離子強度0.075),為電極緩沖液。
3、凝膠緩沖液取三羥甲基氨基甲烷1.212g、EDTA0.29g及NaCl5.85g,用蒸餾水溶解后,稀釋至1000ml,pH為8.6。
4、瓊脂糖凝膠稱取瓊脂糖0.45 g溶于50 ml凝膠緩沖液中,再加水50 ml。在水浴中加熱至沸,待瓊脂糖*溶解后,立即停止加熱。

【注意事項】
1、電泳樣品應為新鮮的空腹血清。
2、加熱溶化瓊脂時,須防止水份蒸發過多。瓊脂糖凝膠隨用隨制,以免凝膠表面干燥,影響分離效果。
3、制作凝膠板時瓊脂糖濃度一般選用0.5%左右為宜,高于1%以上α-脂蛋白部分較緊密,β和前β-脂蛋白部分不夠清晰;低于4.5%則凝固性較差,圖譜不清。
4、點樣口要大小適宜,邊緣整齊、光滑,否則會影響電泳圖譜。
5、在α-脂蛋白前若出現較淺區帶,可列為前α-脂蛋白。

【正常參考范圍】
α-脂蛋白 20~30%
β-脂蛋白 20~30%
前β-脂蛋白 0~28%
乳糜微粒(-)

上一個:蛋白質技術專題:聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定IgG純度

返回列表

下一個:蛋白質技術專題:凝膠過濾層析實驗

无码国产精品一区二区免费式直播| 美国少归BVBV| 自拍偷在线精品自拍偷| 人妻有码中文字幕| 国产精品无码免费视频二三区| 亚洲变态另类调教久久久| 麻豆妓女爽爽一区二区三| 把八重神子焯出白水怎么办| 偷炮少妇宾馆半推半就激情| 精品一区二区三区在线视频 | 亚洲乱码精品久久久久..| 久久久久精品国产四虎1| 99精品一区二区三区无码吞精| 日日狠狠久久偷偷四色综合免费 | А√天堂中文最新版在线种子| 天堂√中文最新版在线| 精品久久香蕉国产线看观看亚洲| 18禁美女裸体无遮挡免费观看国| 色哟哟精品网站在线观看| 国产在线精品一区二区高清不卡| 曰韩欧美群交P片内射| 日韩人妻中文无码一区二区三区| 精品乱码一区二区三区av| 少妇乳大丰满在线播放| 国精产品999国精产品官网| 一面膜上边一面膜下边53分钟 | 国产精品女同久久久久电影院| 没有被爱过的女人| 粉嫩aV一区二区三区| 玉蒲团Ⅲ艳乳欲仙欲| 无码人妻精品一区二区三区蜜桃| 女人高潮抽搐30分钟| 黑人疯狂巨大XXⅩ0O0| 白丝制服被啪到喷水很黄很暴力| 亚洲日韩乱码久久久久久| 双胞胎一前一后夹心饼干年下| 免费XXXXX大片在线观看一区| 国产小视频A在线观看| 日韩精品一区二区三区影院| 99亚洲乱人伦AⅤ精品| 亚洲AV无码久久久久久精品同性| 人妻丰满熟妇av无码区HD优| 久久99精品久久久久婷综合| 国产96在线 | 亚洲| 中文字幕人妻AV一区二区| 压在稚嫩的身体上耕耘| 日本极品白嫩ASSPICS| 老色鬼永久精品网站| 国产特级毛片AAAAAA视频| 唱歌的大姐姐也想做| 在线成本人国语视频动漫| 亚洲AV无码成人精品区| 色8激情欧美成人久久综合电影| 免费av网站在线观看| 精产国品一二三产品区别在| 国产成人精品白浆久久69| ASSFREE疯狂老妇熟女| 亚洲系列精品少妇系列50P| 无码视频免费一区二三区| 播放片高清MV在线观看| 蜜臀av一区二区三区久久| 狠狠躁夜夜躁人人爽天天5| 狼人青草久久网伊人| 色天使色偷偷色噜噜噜| 野外妓女脱裤子让老头玩| 中文国产成人精品久久| 久久久久久久99精品国产片| 麻豆人妻少妇精品无码专区| 趴下老子要从后面CAO你| 天天做天天爱天天爽综合网| 亚洲日本一本DVD高清| 翁止熄痒苏钥第9章的内容| 亚洲最大AV资源站无码AV网址| 伊人久久精品AV无码一区| 丰满老熟妇好大BBBBB| 国产草草影院CCYYCOM| 久久无码专区国产精品S| 天天天天做夜夜夜夜做无码| JAPAN丰满人妻HDXXXX| 久久久久久久精品无码Av少妇| 人妻久久久一区二区三区| 亚洲AV无码成人精品区| 99在线精品视频在线观看| 春色精品久久久久午夜aⅴ| 国产高清中文版HD中字 | 韩国三级丰满少妇高潮| 国产亚州精品女人久久久久久| 国产无遮挡无码视频免费软件| 欧美肉体裸交做爰XXXⅩ性玉| 日本亚欧乱色视频在线| 亚洲夜夜性无码国产盗摄| 贵阳40多岁熟女高潮呻吟| 欧美乱妇狂野欧美在线视频| 永久免费无码国产| 国产精品久久久久久一区二区三区| 久久久综合九色综合88| 日韩在线一区二区三区| 亚洲人成网77777色在线播放| 99久久国产福利自产拍| 国产午夜三级一区二区三| 欧美丰满熟妇性XXXX| 亚洲色WWW永久网站| 韩国午夜理伦三级理论三级| 哦┅┅快┅┅用力啊┅┅在线观看| 性色AV浪潮AV色欲AV| CF穿越火线女去衣看奶| 国产日产欧产系列| 色妞色视频一区二区三区四区| 99久久人妻无码中文字幕系列| 国产亚洲精选美女久久久久 | 精品人妻潮喷久久久又裸又黄| 色狠狠AV一区二区三区| 一区二区三区无码在线观看| 国产VA免费精品高清在线| 男按摩师舌头伸进去了| 无码人妻一区二区三区在线视频| 中文字幕一线产区和二线| 九妹免费观看完整版| 性生生活大片又黄又| 国产乱妇无码大片在线观看| 人人妻人人澡人人爽人人蜜臀| 又小又紧女MAGNET| 久久久久精品少妇9999| 人妻丰满熟妇AV无码区| 泑女网址WWW呦女| 久久精品影视免费观看| 婬乱丰满熟妇XXXXX性| 久久精品麻豆日日躁夜夜躁| 在线无码午夜福利高潮视频| 国内综合精品午夜久久资源| 同性男男黄G片免费网站| 玩弄人妻少妇500系列网址| 婬乱丰满熟妇XXXXX性| 国产影片AV级毛片特别刺激| 欧美性BBBBBXXXXX4050免费看| 亚洲精品午睡沙发系列| 国产午夜成人免费看片APP| 无码专区狠狠躁躁天天躁| 国产亚洲欧美精品一区| 少妇泬出白浆18P试看| 成年无码动漫AV片在线观看羞羞| 青青草无码精品伊人久久| 亚洲精选无码久久久| 精品久久国产综合婷婷五月| 亚洲精品国产一区二区三区在线观| 久久精品无码一区二区WWW| 日本少妇人妻XXXXX18免费| 干的你走不了路SB| 日本最新高清一区二区三| 粉嫩粉嫩的18在线免免费观看| 欧洲精品码一区二区三区免费看| 中国猛少妇色XXXXX| 久久国国产免费999| 亚洲A∨无码一区二区三区| 国产无遮挡裸体免费视频| 天天躁日日躁狠狠躁欧美老妇小说 | 91人妻人人澡人人爽人人| 国产日产欧产精品精品软件| 亚洲VA中文字幕无码一二三区| 国产又黄又大又粗的视频| 野花日本大全免费观看2019| 人伦亲情父母儿女的句子简短| 国产成人一区二区三区在线| 野草高清视频免费| 女人与公拘交酡过程高清视频| 办公室撕开奶罩揉吮奶漫画| 韩国三级L中文字幕无码| 亚洲精品无码不卡在线播HE| 京东天美麻豆果冻传媒| 亚洲精品国产精品乱码不卡√| 精品久久人人妻人人做精品| 亚洲国产成人无码精品| 久久婷婷五月综合色区| 把腿张开让老子臊烂你的动漫视频 | 精品久久无码中文字幕| 亚洲AV日韩AV永久无码水密桃| 国产成人无码A区在线观看视频A| 亚洲 小说 欧美 激情 另类| 久久久久亚洲AV成人网址| 51精产国品一二三产区区| 色欲AV蜜桃一区二区三| 国产欧美精品一区二区三区四区 | 欧洲人激情毛片无码视频| 51久久精品人人搡人人玩| 95W乳液78WYW永久| 特级毛片内射WWW无码| 国产精品55夜色66夜色| 亚洲AV永久无无码精品一区二区 | 免费无码一区二区三区蜜桃大| 91人妻人人做人碰人人爽蜜闫 | 精品亚洲国产成AV人片传媒| 亚洲中文久久精品无码照片| 蜜臀久久99精品久久久久久小说 | 亚州AV无码人妻一区二区三区| 狠狠色综合7777久夜色撩人| 亚洲国产成人精品无码区花野真一| 精品人妻人人做人人爽| 又硬又粗又长又爽免费看| 奶头从情趣内衣下露了出来AV | 欧美性猛交ⅩXXX乱大交|